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、内在性遺伝子座に挿入されると、その遺伝子が破壊されることを利用する(図1)。破壊された遺伝子は、RACE法やLAM-PCR法によって同定するが、RACE法ではおおよその位置しか特定できないのに対して、LAM-PCR法では1塩基レベルで挿入位置が特定できる(図2)。

【図1】(A)プロモータートラップ;発現している内在性遺伝子のプロモーターの下流に挿入された場合にのみレポーター遺伝子(X)が転写される。(B)ポリAトラップ;内在性遺伝子のポリA付加シグナルの前に挿入された場合のみレポーター遺伝子(X)が発現する。いずれの場合も薬剤耐性遺伝子やGFP蛍光遺伝子をレポーターとして用いることにより選択する。

【図2】(A)ポリAトラップでは、レポーター遺伝子の後にトラップした遺伝子のエクソンが繋がったキメラmRNAが作られる。それを基に3'-RACEすることにより、破壊された遺伝子を同定する。ただしベクターが挿入されたイントロンは分かるが V-VISION ヴェルファイア(20系) Zグレード フロントバンパースポイラー(ネット・カナード付) FRP製/ブイビジョン エアロ バンパー スポイラー 【アクレ / acre】スリットタイプディスクローター フロント用・左右2枚セット サニー HB14 などにお勧め 品番:2F036(SLT・Front) SLT ブレーキローター 、塩基レベルでの同定は困難である。(B)LAM-PCR法ではリンカー配列とベクター配列の間で増幅した産物をシーケンスできるので HONDA N-ONE(minor前) H24.11~H26.4 JG1・2 ヘッドライト(LO)「HIR2」白色 LED HIR2 2個入り LEDヘッドライト 6000LM PHILIPS 12V 24V 6500K 宅配便送料無料 6ヶ月保証 K&M、挿入位置を1塩基レベルで特定できる。

2.レンチウイルスベクターを用いた遺伝子トラップ

我々はポリA遺伝子トラップカセットを挿入したレンチウイルスベクターを用いることでランダム遺伝子破壊したマウスを作製している。これまでに200系統を超えるマウスと1000系統近いES細胞株を樹立しており 【メーカー在庫あり】 三菱マテリアル(株) 三菱K バイオレット高精度ドリル12.5mm VAPDMD1250 JP店、破壊遺伝子を同定すると同時にCARD理研BRCなどの公的バイオリソースセンターを通じて分与開始している。


LT-OPGシリーズ;PGKプロモーターで発現するEGFPを基に選択して作製した遺伝子破壊マウス
LT-OCGシリーズ;CAGプロモーターで発現するEGFPを基に選択して作製した遺伝子破壊マウス

詳細については直接、

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、伊川正人(メンバーリンク)までお問い合わせください。

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